项目经历（案例一）

项目时间：2009-01到2016-03

项目名称：转基因生物新品种培育科技重大专项

项目描述：

项目介绍

课题总体目标：

克隆大豆胞囊线虫的致死基因，通过体外RNAi鉴定这些基因的功能。运用转基因技术在大豆根中表达上述候选基因的dsRNA，验证植物介导的RNAi对大豆胞囊线虫的致死作用。获得具有自主知识产权的控制大豆胞囊线虫的相关基因和方法。为培育大豆抗胞囊线虫种质提供新基因和新方法。

研究内容：

1. 以秀丽线虫的致死基因为参照标准，克隆大豆胞囊线虫的同源致死候选基因。

2. 建立体外大豆胞囊线虫的RNAi技术体系，验证所克隆的上述候选基因的功能。

3. 通过转基因技术，在大豆根系中表达上述候选基因的dsRNA，研究植物表达的dsRNA对大豆胞囊线虫体内相应基因的下调作用及致死作用。

4. 进一步检测转基因根系喂食的胞囊线虫中目的基因的表达特征，以确认所用方法的可靠性。

我接手本项目需承担的工作

1.大豆胞囊线虫的分离纯化、鉴定、培养。

2.胞囊线虫对转基因大豆根系的侵染研究。

3.检测根系对线虫的抗性。

我的职责

接手项目合作伙伴的前期工作，继续完成项目包含的内容。

主要发表的文章：发根农杆菌介导不同基因型大豆转化效率的筛选.河南农业科学,2012

专利：

1.一种大豆胞囊线虫抗性鉴定方法。专利编号：201110125396

2.大豆胞囊线虫RNA解旋酶CGH-1及其编码基因与应用。CN201110317555.5

项目经历（案例二）

项目时间：2013-07到2016-03

项目名称：国家自然科学基金项目子课题——猕猴桃种质基因组遗传多样性及种间亲缘关系研究

项目描述：

项目介绍

本项目主要 1）从EST序列和基因组测序数据中大规模开发SNP分子标记，在猕猴桃资源库中的代表性种质中对部分SNP进行高通量分型验证，用于猕猴桃种质的遗传评价；2）同时开发品种/物种特有SNP标记，用于猕猴桃种质的分子鉴定。

最终，1）得到了100多个SNP标记，很好地解析了所用种质遗传背景，指导种质开发利用和核心种质库构建；2）开发得到一批猕猴桃属物种及品种特异SNP标记用于品种鉴定；研究结果兼具重要的理论和应用价值。

我的职责

全程负责实验操作及数据分析工作：1.大量阅读文献，了解研究背景，发现问题并确定研究课题；2.明确研究方法，对生物信息学开发得到的SNP标记进行筛选，用MassARRAY DNA质谱仪进行SNP分型验证。对分型数据进行分析应用于猕猴桃种质资源评价，并开发猕猴桃物种或品种特有SNP用于种质的分子鉴定；3.论文撰写；

项目经历（案例三）

项目时间：2011-01到2016-03

项目名称：北京市农林科学院科技创新专项 “生防种质资源库建设与综合利用” (KJCX201101001)

项目描述：

项目介绍

研究目标

1.通过对中国特殊生境地区土壤采集，分别进行样品分离，培养，筛选，保存等工作，初步对土壤细菌、真菌、放线菌、酵母菌等微生物进行分离保存。

2.通过对初步筛选的土壤微生物进行多种病原菌抑菌谱测定，明确不同土壤微生物对应不同靶标病害，为明确土壤微生物对靶标病害的生防机制提供依据。

3.采用16SrDNA ITSrDNA基因序列初步鉴定具有生防作用的土壤微生物，同时根据菌株形态特征，生理生化特性、碳源利用等指标，进一步鉴定菌株分类，为鉴定微生物新种质资源及具有生防机制菌株奠定基础。

主要研究内容：

1.菌株的分离及保存：将西藏、贵州、青海等特殊生境地区采集的土壤样品，进行称样，加水，摇晃培养，按一定稀释倍数分别涂布于PDA、马丁、牛肉膏蛋白胨、YPD等培养基，进行放线菌、真菌、细菌、酵母菌的分离培养，挑选及保存工作。

2.菌株的抑菌谱测定：将挑选出来的各类菌株分别对葡萄炭疽、黄瓜枯萎、番茄灰霉等病原菌进行对峙培养，挑选具有生防作用的微生物菌株。

3.菌株的种类鉴定：将具有生防作用的真菌进行ITS序列鉴定，细菌及放线菌进行16S鉴定，初步明确微生物种属。结合形态特征，生理生化特性及碳源利用等指标进一步鉴定生防微生物。

我的职责

项目的参与者之一，主要负责从中国特殊生境西藏、贵州、青海地区采集土样，负责土壤细菌、真菌、放线菌等微生物的分离，培养，筛选，保存，及部分菌株的鉴定工作。

发表的文章：一株生防细菌的分离鉴定及其抑菌活性物质的分析.中国农学通报，2012

项目经历（案例四）

项目时间：2014-01到2016-03

项目名称：北京市农林科学院青年科研基金

项目描述：

项目介绍

研究目标

（1）通过对多粘类芽孢杆菌抗生素产物分离鉴定及高效液相色谱法检测，明确不同来源的两株多粘类芽孢杆菌Fusaricidins 类型，建立Fusaricidins检测体系。

（2）通过对Fusaricidins提取物进行多种病原菌抑菌谱测定，确定主要靶标病害，为其生防产品的开发和登记试验提供依据。

（3）优化Fusaricidins 类抗生素发酵工艺，放大到5L、30L发酵罐，为提高产品质量、降低生产成本奠定基础。

主要研究内容：

（1）Fusaricidins 类抗生素分离鉴定：将两株多粘类芽孢杆菌发酵液经酸化加热离心萃取，通过层析、高效液相色谱法分离纯化并检测Fusaricidins，确定其类型及浓度。

（2）Fusaricidins 类抗生素生物活性验证：以甘蓝枯萎病、番茄灰霉病、黄瓜枯萎病等多种病害为靶标，进行抑菌谱的检测及盆栽试验防治效果验证。

（3）Fusaricidins 类抗生素发酵工艺研究：发酵培养基及发酵参数的优化，建立高产发酵工艺，并进行不同体积发酵罐放大验证。

我的职责

项目的执行者

主要发表的文章：Expression of Paenibacillus polymyxa -1,3-1,4-glucanase in Streptomyces lydicus A01 improves its biocontrol effect against Botrytis cinerea. Biological Control,2015